AAV载体高剂量给药的安全性问题浅析
基因疗法AT-132以AAV8为载体将治疗基因运送到细胞内，AAV8是一种在基因治疗中非常常用的AAV血清型。ClinicalTrials.gov数据显示，在迄今进行的180个以AAV为载体的基因治疗试验中，有14个使用了AAV8(见表1)。重要的是，在迄今接受AAV8治疗的近250名患者中，没有发生任何其他严重的此类不良事件，表明了AAV8这种衣壳的高安全性。
上述死亡的两位患者都在ASPIRO基因治疗临床试验的高剂量给药组。，每公斤体重给药3X10^14个载体基因组剂量(3X10^14vg/kg)。这是目前成人或儿童注射AAV的最高剂量之一(见表2)。此外，这两位患者年龄较小，都处于年龄下限的较高水平（低于5岁）。举个例子，假设这些患者4岁，那么他们很可能重13.5公斤，注射剂量超过4×10^15vg，这仅仅是对含有相应基因组的颗粒数的测量。AT-132基因疗法药物中空衣壳或不完整衣壳的数量未公开，其中的空衣壳或不完整衣壳将提高AAV8的给药剂量负担。业内目前没有通用的标准化方法来检测AAV载体的滴度，因此目前所有临床试验中AAV剂量应该被认为是近似的。
AT-132基因治疗临床试验中高剂量给药组的三名男孩患者发展成严重的肝胆疾病；其中两名男孩死于细菌感染和败血症。虽然XLMTM是一种骨骼肌疾病，但其并发症往往包括许多其他器官系统，例如肝脏。据报道，死亡的两名男孩都患有某种形式的预先存在的肝胆疾病(其疾病细节未透露)。死亡事件可能与给药前患者存在的肝胆疾病相关，因为不管AAV最终的靶器官是什么，通过静脉给药的AAV都会经静脉传输到肝脏，因此，肝脏必定经过这些大剂量病毒的刺激，肯定会造成一定的肝脏毒性，如果肝脏事先已有损伤或功能障碍，那么其肝毒性会更甚。与此相关的是，在接受高剂量全身给药AAV的患者中发生了一些其他严重的不良事件（其严重程度不同）（见表3）。其副作用很大程度上是由于天然免疫反应(如炎症和补体激活)和特异性免疫反应所致。
表3
上述两个男孩的死亡事件对该领域的影响很大，作为科技人员和临床医生，有责任确保这种情况不会再次发生。希望能尽快公布更多的细节，以便使人们能够了解发生了什么，并设计出最佳的解决方案来推动这一领域的发展。
（微信公众号“基因治疗领域”近期将会在基因治疗的安全性方面做系列专题，敬请关注。）
1、https://www.joshuafrase.org/get-involved/recensus-study.php.
2、Search of: AAV | Interventional Studies – List Results – ClinicalTrials.gov.
3、Search of: AAV8 | Interventional Studies – List Results – ClinicalTrials.gov.
4、Mendell, J. R. et al. Single-Dose Gene-Replacement Therapy for Spinal Muscular Atrophy. New Engl. J. Med. 377, 1713–1722 (2017).
5、https://www.prnewswire.com/news-releases/audentes-announces-positive-interim-data-from-first-dose-cohort-of-aspiro-a-phase-12-clinical-trial-of-at132-in-patients-with-x-linked-myotubular-myopathy-300577455.html.
6、https://www.solidbio.com/about/media/news/letter-to-the-duchenne-community-about-the-status-of-the-ignite-dmd-clinical-trial.
7、https://www.fiercebiotech.com/biotech/solid-bio-sees-yet-another-clinical-hold-for-its-dmd-gene-therapy.
8、https://investors.pfizer.com/investor-news/press-release-details/2020/Pfizers-New-Phase-1b-Results-of-Gene-Therapy-in-Ambulatory-Boys-with-Duchenne-Muscular-Dystrophy-DMD-Support-Advancement-into-Pivotal-Phase-3-Study/default.aspx.
9、Wilson, J. M. & Flotte, T. R. Moving Forward After Two Deaths in a Gene Therapy Trial of Myotubular Myopathy. Human Gene Therapy (2020) doi:10.1089/hum.2020.182.
10、Flotte, T. R., Editor-in-Chief. Revisiting the ‘New’ Inflammatory Toxicities of Adeno-Associated Virus Vectors. Hum. Gene Ther. 31, 398–399 (2020).
Rumachik, N. G. et al. Methods Matter: Standard Production Platforms for 11、Recombinant AAV Produce Chemically and Functionally Distinct Vectors. Molecular Therapy – Methods & Clinical Development vol. 18 98–118 (2020).
12、Davidoff, A. M., Ng, C. Y. C., Zhou, J., Spence, Y. & Nathwani, A. C. Sex significantly influences transduction of murine liver by recombinant adeno-associated viral vectors through an androgen-dependent pathway. Blood 102, 480–488 (2003).