经典力作|谢道昕-一个基因的定位，居然能发Science（COI1蛋白的定位过程）
编者按：总是会有人说，周杰伦的经典歌曲是《稻香》，《双节棍》等；刘德华的《忘情水》，《来生缘》等，这些歌曲都是百听不厌，常听常新的，而且听起来的感觉都是不一样的。但是，怎么评价学术界的经典文章或者是成名作呢？有的人认为，发的影响因子越高越好，这样就是经典文章。但是，iNature认为，作为经典文章，肯定使用的人很多，而且看的人也是拍手叫绝，所以我们是根据总引用量，来客观的评价一篇文章。今天就推出谢道昕高引用量的一篇文章（非综述类），以飨读者。
iNature：coi1突变定义了响应茉莉酮酸酯所需的拟南芥基因，可以调节对昆虫和病原体的防御，伤口愈合和花粉生育力。 野生型等位基因COI1初步定位到90kb基因组片段，并通过coi1-1突变体的互补来详细的定位到这个基因。 预测的COI1蛋白质的氨基酸序列含有16个富含亮氨酸的重复序列和一个F-Box的结构域。 它与拟南芥中的TIR1，人类Skp2和酵母Grr1的F-box蛋白具有相似性，似乎通过靶向阻遏蛋白，使用泛素化作用来起作用。
包括茉莉酸及其环戊酮衍生物的茉莉酸（Jas）在植物界广泛分布。它们是由未受损组织中的亚麻酸的十八烷酸途径合成的，并且（明显地）是由受伤组织中的不同途径合成的。 JA影响植物中的各种过程，包括根部生长，果实成熟，衰老，花粉发育，块茎形成，卷须卷曲以及防御害虫和病原体。他们改变基因转录，RNA加工和翻译【1】。
JA通路
番茄通过制造抑制昆虫消化蛋白酶抑制剂（pin）蛋白来对损伤（例如由昆虫咀嚼引起的损伤）作出反应【2】。 JA是植物防御昆虫捕食所必需的【3】，并且与受伤组织中形成的乙烯一起起作用以调节pin基因表达【4】。在拟南芥中，JA的功能由三重突变体fad3-2 fad7-2 fad8确定，缺少亚麻酸JA【5】的前体和coi1突变体【6】和其他突变体【7】对JA的敏感度降低。
定位COI1基因
fad3-2 fad7-2 fad8和coi1突变体伤口反应不敏感【8,9】，昆虫咀嚼，造成拟南芥死亡率高【8,10】，它们产生不能存活的花粉【5,6】。用JA处理植物可纠正fad3-2 fad7-2 fad8中的这些缺陷，但不能纠正col1【5,6,8-10】。 coi1突变因此定义了一个基因，COI1，在JA信号通路中发挥功能，是花粉发育和防御害虫所必需的，也是防御病原体反应的基础【11】。为了研究它的功能，谢道昕等人使用了一个基于图位克隆的策略来鉴定COI1。
互补实验
COI1蛋白的预测氨基酸序列含有一个简并的F-box基序【12】和16个不完全一样的富亮氨酸重复序列（LRRs）【13】，这两个结构域都涉及蛋白质 - 蛋白质相互作用【13,14】。数据库检索表明，COI1与三种含LRR的F盒蛋白有关：拟南芥TIR1【15】，与其具有34％的同一性，以及人Skp2和酵母Grr1【12,14】。 TIR1是对生长素反应所必需的，而tir1突变体是对生长素抑制根生长敏感性降低的可育植物。
COI1的蛋白序列预测
然而，coi1突变体是雄性不育的，对生长素抑制生长具有敏感性【10】。因此很明显，COI1和TIR1在不同的信号通路中起作用。 Skp2和Grr1调节细胞分裂，Grr1也调节营养摄取【16】。这些和其他F-box蛋白作为选择性招募阻遏蛋白，去除靶底物的泛素化所需的复合物的受体发挥功能（14）。推测COI1可能是一种F盒蛋白，可以通过泛素化修饰，进行防御反应和花粉发育的调节因子。
原文链接
http://science.sciencemag.org/content/280/5366/1091
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